Stem Stem Cell Using CRISPR CAS9 to Induce Gene Knockout in Human Stem

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slide 1:

S t e m S t e m C e l l : U s i n g C R I S P R / C A S 9 t o I n d u c e G e n e K n o c k o u t i n H u m a n S t e m C e l l L i n e T h e h i g h l i g h t s o f t h i s p a p e r :  T h i s p a p e r d e s c r i b e s a n e f f e c t i v e m e t h o d f o r i n d u c i n g g e n e k n o c k o u t i n h P S C c e l l l i n e .  D u a l - s g R N A t a r g e t i n g f u n c t i o n i s e s s e n t i a l f o r F R T t o a c h i e v e b i a l l e l i c k n o c k i n a c c u r a t e l y .  I n d u c e d g e n e k n o c k o u t c a n b e a c h i e v e d i n a l l c e l l s o f a n y d i f f e r e n t i a t i o n s t a g e .  U s i n g t h i s m e t h o d w e c a n a l s o c a r r y o u t t h e m u l t i g e n e i n d u c e d k n o c k o u t . R e c e n t l y a C h i n e s e s c i e n t i s t w h o s e n a m e i s S u - C h u n Z h a n g f r o m t h e U n i v e r s i t y o f W i s c o n s i n p u b l i s h e d a n e w s t u d y p r o g r e s s i n t h e i n t e r n a t i o n a l a c a d e m i c j o u r n a l C e l l s t e m c e l l . T h e y u s e d C R I S P R / C A S 9 t e c h n o l o g y t o a c h i e v e t h e i n d u c i b l e g e n e k n o c k o u t o f h u m a n s t e m c e l l l i n e s . T h i s s u c c e s s f u l m e t h o d h a s a n i m p o r t a n t r o l e i n p r o m o t i n g t h e s t u d y o f g e n e i n s t e m c e l l s a n d d i f f e r e n t i a t i o n i n d i f f e r e n t s t a g e s . T h e p r e c i s e t e m p o r a l r e g u l a t i o n o n g e n e e x p r e s s i o n i s v e r y i m p o r t a n t t o c l a r i f y t h e f u n c t i o n o f a g e n e i n b i o l o g i c a l s y s t e m s . B u t s o f a r t h e r e a r e s t i l l a b i g c h a l l e n g e s t o a c h i e v e i n d u c i b l e g e n e k n o c k o u t i n h u m a n p l u r i p o t e n t s t e m c e l l s a n d e s t a b l i s h t h e i n d u c i b l e g e n e k n o c k o u t h u m a n s t e m c e l l l i n e s . I n t h i s s t u d y t h e r e s e a r c h e r s e s t a b l i s h e d t h e h u m a n p l u r i p o t e n t s t e m c e l l l i n e s b y t h e C R I S P R / C A S 9 m e d i a t e d g e n o m e e d i t i n g F R T / F l p a n d C r e / L o x P s y s t e m . T h e r e s e a r c h e r s f o u n d t h a t t h e t a r g e t i n g f u n c t i o n o f d u a l - s g R N A w o u l d b e v e r y i m p o r t a n t f o r t h e p r e c i s e b i a l l e l i c k n o c k i n i n t h e s e q u e n c e o f F R T . I n a d d i t i o n t h e y a l s o d e v e l o p e d a n e w s t r a t e g y t h a t l e a d i n g t h e r e c o m b i n a n t e n z y m e e x p r e s s i o n s y s t e m w h i c h c o u l d r e g u l a t e a c t i v i t y i n t o t h e c e l l r e m o v i n g t h e d r u g r e s i s t a n c e g e n e . B y u s i n g t h i s m e t h o d w e c a n a c c e l e r a t e t h e s p e e d t o g a i n i K O h P S C c e l l l i n e s . T h r o u g h t h e t w o - s t e p k n o c k i n s t r a t e g y r e s e a r c h e r s r e a l i z e d i n d u c e d g e n e k n o c k o u t t o S O X 2 P A X 6 O T X 2 A G O 2 g e n e s i n h u m a n e m b r y o n i c s t e m c e l l s a n d i n d u c e d p l u r i p o t e n t s t e m c e l l s a n d e s t a b l i s h e d c e l l l i n e s . T h e r e s e a r c h e r s b e l i e v e t h a t i K O h p s c c e l l l i n e s e s t a b l i s h e d t h r o u g h t h i s m e t h o d w i l l c h a n g e t h e w a y t o r e s e a r c h g e n e f u n c t i o n i n h u m a n c e l l s i n t h e p a s t . I t i s o f g r e a t s i g n i f i c a n c e i n t h e p r o m o t i o n o f s t e m c e l l r e s e a r c h p r o g r e s s . A b o u t t h e a u t h o r : C r e a t i v e A n i m o d e l i s b a s e d o n t h e t r a d i t i o n a l m o u s e k n o c k o u t t e c h n o l o g y c o m m i t t e d t o d e v e l o p i n g a n d p r o d u c i n g g e n e t a r g e t e d m o u s e m o d e l s . W i t h t h e d e v e l o p m e n t o f s c i e n c e a n d t e c h n o l o g y a s w e l l a s o u r o u t s t a n d i n g t e a m C r e a t i v e A n i m o d e l e x t e n d s o u r c o r e c o m p e t e n c i e s f a c i n g t h e c h a l l e n g i n g a n d c o m p l e x c h a n g e s c o n t i n u i n g t o b r i n g a p o w e r f u l r e s e a r c h t o o l s f o r o u r c u s t o m e r s .

slide 2:

T h e o r i g i n a l a r t i c l e : h t t p : / / w w w . q m e d . c o m / n e w s / s u p p l i e r / s t e m - s t e m - c e l l - u s i n g - c r i s p r c a s 9 - i n d u c e - g e n e - k n o c k o u t - h u m a n - s t e m - c e l l - l i n e