teknik membuat preparat jaringan

Views:
 
Category: Education
     
 

Presentation Description

No description available.

Comments

Presentation Transcript

PowerPoint Presentation:

Dosen Pembimbing : Andri Hutari S.Si, M.Sc TEKNIK PEMBUATAN SEDIAAN HISTOLOGIS JARINGAN HEWAN BIOLOGI 5C Pemateri : Melia Hartanti Ratih Mailanti Rafian Mutiara Tami

FIKSASI:

FIKSASI Suatu usaha untuk mempertahankan elemen-elemen sel atau jaringan agar tetap pada tempatnya dan tidak mengalami perubahan bentuk maupun ukuran . Fiksasi berfungsi untuk mempertahankan bentuk jaringan sedemikian rupa sehingga perubahan-perubahan bentuk / struktur sel jaringan yang mungkin terjadi hanya sekecil mungkin

Lamanya fiksasi tergantung dari : :

Lamanya fiksasi tergantung dari : Macamnya jaringan, misalnya jaringan tendo akan memakan waktu lebih lama daripada jaringan intestinum Tebal dan tipisnya jaringan; makin tebal jaringan yang difiksasi, makin lama waktu yang diperlukan.

Cara Melakukan Fiksasi ::

Organ yang telah diisolasi dimasukkan ke dalam botol film yang berisi larutan fiksatif berupa larutan Bouin selama 24 jam Setelah 24 jam, organ tersebut kemudian dipindahkan ke botol fim yang berisi larutan alkohol 70% Cara Melakukan Fiksasi :

DEHIDRASI:

DEHIDRASI Bertujuan untuk penarikan molekul air dari dalam jaringan. Proses ini sangat penting terutama untuk jaringan-jaringan yang akan dibuat preparat irisan. Biasanya proses dehidrasi dilakukan setelah proses fiksasi selesai

PowerPoint Presentation:

Proses dehidrasi dijalankan secara perlahan-lahan menggunakan alkohol bertingkat , dimulai dengan alkohol prosentase rendah sampai dengan alkohol absolute. Dimulai dengan alkohol 30 %, kemudian 50 %, 70 %, 80 %, 95 %, alkohol absolute. Waktu yang dipergunakan untuk setiap tingkat alkohol tergantung dari besar kecilnya jaringan . Alkohol absolute mempunyai kemampuan memperkeras jaringan . Sebagai ancar-ancar jaringan jangan ditinggalkan didalam alkohol tersebut lebih dari 1 atau 2 jamuntuk jaringan berukuran biasa ( tebal 2-4 mm)

PENJERNIHAN ( CLEARING ):

Penjernihan atau clearing adalah suatu proses yang dilakukan setelah tahapan dehidrasi yang berfungsi untuk membuat jaringan menjadi jernih dan transparan . Medium penjernih ini akan menjernihkan atau mentranparankan jaringan agar dapat terwarnai dengan baik dan memperlihatkan warna sesuai dengan warna pewarnanya . PENJERNIHAN ( CLEARING )

PowerPoint Presentation:

Waktu yang digunakan untuk proses penjernihan tergantung pada : Ketebalan dan tingkat kepadatan jaringan Zat penjernih yang digunakan Jenis jaringan

PowerPoint Presentation:

Proses penjernihan : Dilakukan dengan merendam organ dalam larutan benzil benzoat selama 24 jam Kemudian organ tersebut dimasukkan dalam benzol sebanyak 2 kali ulangan, masing-masing selama 15 menit.

INFILTRASI ( INFILTRATION ):

INFILTRASI ( INFILTRATION ) Infiltrasi adalah suatu usaha menyusupkan media penanaman (embedding media) ke dalam jaringan dengan jalan menggantikan kedudukan dehidran dan bahan penjernih (clearing agents). Tujuan tahap infiltrasi ini adalah untuk mengisi jaringan dengan parafin sebagi pengikat jaringan agar tetap memiliki bentuk dan struktur yang sama seperti hidup

PowerPoint Presentation:

Proses infiltrasi dilakukan dengan merendam organ di dalam inkubator dengan suhu tetap (72°C) dalam parafin cair yang diisikan pada botol film. Organ kemudian diletakkan dalam botol film berisi parafin cair sebanyak 2 kali ulangan, masing-masing selama 2 jam.

PowerPoint Presentation:

Oven 1 Oven 2 : suhu sangat tinggi 200 °C

PowerPoint Presentation:

Pencetakan Merendam organ dalam cetakan blok parafin, setelah mengering lalu dipotong ( pemotongan blok parafin menggunakan pisau yang telah di panaskan di atas api,hal ini bertujuan agar parafin tidak rusak) sesuai sedemikian rupa berbentuk persegi dan di lekatkan pada sebuah balok kayu yang berukuran kecil, blok tersebut di beri label dan siap di sayat menggunakan mikrotom . Merendam organ dalam cetakan blok parafin,lalu blok tersebut di beri label dan siap di sayat menggunakan mikrotom,

PowerPoint Presentation:

Kertas untuk mencetak blok parafin Pisau dan bunsen Hasil cetakan blok parafin dan blok parafin yang telah di potong Blok parafin yang di sambung ke balok kayu

PowerPoint Presentation:

Memotong jaringan dengan menggunakan mikrotom hingga menghasilkan pita sayatan jaringan. Menyiapkan object glass yang telah di olesi albumin meyer dan di tetesi air,lalu lekatkan pita hasil sayatan tadi pada object glass K emudian di panaskan di atas paraffin stretcher pada suhu 46 ◦ C hingga jaringan mengembang dan cukup kering . Penyayatan…

PowerPoint Presentation:

Mikrotom putar Albumin meyer Air putih Hot plate

PEWARNAAN:

PEWARNAAN

Proses pewarnaan…:

Proses pewarnaan… Preparat yang sudah ditempel pada gelas obyek, dimasukkan ke dalam staining jar (Rak pewarnaan) Preparat sebelum diwarnai Staining Jar

PowerPoint Presentation:

Kemudian preparat dimasukkan ke dalam larutan xylol 1 dan xylol 2 masing-masing selama 5 menit . Kemudian preparat direndam didalam larutan seri alkohol yaitu dimulai dari alkohol 100% ( absolut ), alkohol 96%, dan alkohol 70% masing-masing selama 3 menit . Kemudian preparat memasuki tahap pewarnaan .

PowerPoint Presentation:

5. Proses pewarnaan dimulai dengan merendam preparat dalam larutan Hematoksilin Bohmer 1% selama 4 menit. Kemudian preparat dicuci dengan air yang mengalir. 6. Selanjutnya preparat direndam dalam larutan Eosin 1% selama 4 menit.

PowerPoint Presentation:

7. Preparat yang telah diwarnai, kemudian dimasukkan kembali ke dalam larutan seri alkohol yaitu, dimulai dari alkohol 70%, alkohol 96% dan alkohol 100% (absolut) masing-masing selama 3 menit. 8. Preparat tersebut kemudian direndam di dalam larutan xylol sebanyak 2 kali ( xylol 1 dan xylol 2), masing-masing selama 3 menit. Langkah ini merupakan langkah pelepasan paraffin (deparafinnasi)

Macam-Macam Alkohol yang Digunakan:

Macam-Macam Alkohol yang Digunakan

Rangkaian Pewarnaan:

Rangkaian Pewarnaan Lar. seri alkohol Lar. seri alkohol Larutan xylol Larutan xylol Lar. Hematoksilin dan Lar. Eosin

Hasil Pewarnaan:

Hasil Pewarnaan Keterangan : Gbr 1 : Preparat yang belum pewarnaan Gbr 2 : Preparat yang telah pewarnaan Gbr 3 : Preparat dengan menggunakan mikroskop Gbr 1 Gbr 2 Gbr 3

PENUTUPAN:

PENUTUPAN Dilakukan dengan menutup sayatan organ yang sebelumnya di tetesi entelan dengan menggunakan cover glass

PowerPoint Presentation:

Thank you!

authorStream Live Help