Dr Zennoun

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Dosage de l’hémoglobine glyquée : 

Dosage de l’hémoglobine glyquée 1er journée médico-chirurgicales Association des médecins privés de Touggourt 17- 18 - 19 novembre

historique : 

historique Fin des année 60 Hétérogénéité structurale de l’Hémoglobine humaine du a la fixation des résidus glucidiques simples Fractions isolées et nommées La plus abondante est l’Hb A1c

historique : 

historique Intérêt : Quand il a été démontrer un parallélisme entre l’augmentation de cette forme d’hémoglobine dans le sang et le degré de l’hyperglycémie D’ou l hypothèse confirmer : qu’un dosage d’Hb A1c constituerai un marqueur de l’équilibre glycémique

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Des études cliniques de Diabet contrôle and complication study(DCTT) Puis celle de U K prospective diabète study (UKPDS)

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Intérêt de ce test dans le suivi du diabète du type I et II la cor relation entre la qualité de l’équilibre glycémique évaluer par l’hbA1c et l’apparition des diverses complications dégénératives

Slide 6: 

Le dosage de L’HbA1c est préconisé pour orienter le traitement a long terme des personnes diabétiques La concentration d’HbA1c est proportionnelle au niveau du glucose dans le sang

Slide 7: 

Bon indicateur du taux quotidien moyen du glucose dans le sang sur les deux derniers mois précédent le dosage Rôle essentiel dans la prévention des complications dégénératives

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Glycoprotéine Fraction glucidique solidement fixée en certains points bien précis des chaînes polypeptidiques Leur formation est dirigé par des enzymes spécifiques Hémoglobine glycosylé (glyqué) Fixation spontanée (non enzymatique) De certains oses simples(glu,galac) Ou dérivés d’oses (gluc 6 phosphate

Nature de l’hémoglobine A1C : 

Nature de l’hémoglobine A1C Hémoglobine d’un adulte sain Hémoglobine A : 97 % Hémoglobine A2 : 2,5% Hémoglobine F : 0,5%

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L’hémoglobine A: Présente une hétérogénéité structurale Chromatographie ou électrophorèse

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Hémoglobine A0 : - ne modifie pas les Phi -forme majeur de l’hémoglobine A Hémoglobine A1 - Modifie les Phi Selon l’endroit ou adhère le sucre et le type de sucre on distingue

Hémoglobine A1a1: fructose1-6diphosphate hémoglobineA1a2 : glucose 6 phosphate hémoglobineA1b : puryvate (hexose non phosphoryle ) Hémoglobine A1c : glucose

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HbA1c c’es le produit de la réaction de condensation non enzymatique entre NH2 de la chaîne de globine (B) Et la fonction aldéhyde d’un ose (glucose)

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Hémoglobine A1c Fraction la mieux caractérisé forme majeur de l’hémoglobine A1 (80%) 4 à 6 °/ de l’hémoglobine total

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La glycosylation de l’HB A1c s’effectue lentement en quelque jours HbA1c instable (Base de schifts) labile (étape réversible) Transformation lente(réarrangement d’amidori) HbA1c stable

Dosage de l’HbA1c : 

Dosage de l’HbA1c Technique de dosage repose sur deux principes Propriété physico- chimique: méthode chromatographique ou électrophorétique Propriété antigénique: méthode immunologique.

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On distingue 3 groupes (techniques) Électrophorèses en gel d’aga rose et quantification densitométrique Chromatographie en échange d’ion a haute ou basse pression Immunoenzymatique par turbidimétrie ou agglutination de particule de latex

Dosage de l’HbA1C : 

Dosage de l’HbA1C Il n’existe pas de standardisation parfaite entre ces différentes méthodes Variations significatives entre ces résultats

Electrophorèses : 

Electrophorèses Technique très délicate Permet la mise en évidence des Hémoglobines anormales.

Chromatographie en échange d’ion : 

Chromatographie en échange d’ion A subit de nombreuses améliorations Peut se présenté sous sa forme simple mini ou micro colonne A sa forme la plus évoluer chromatographie en phase liquide a haute pression CLHP) En passant par chromatographie liquide a basse pression

Chromatographie par échange d‘ion : 

Chromatographie par échange d‘ion Se pratique sur des colonnes (résine) Technique non automatisable Délicate (pH , température) Urée, acide acetylsalycylé,variant de l’HbF, taux triglycérides augmenté TXHbA1c diminue Hbs

Chromatographie liquide a haute pression(HLPC) : 

Chromatographie liquide a haute pression(HLPC) Technique de référence Avantage : son automatisation,précise et rapide Permet une bonne séparation des différentes formes d’Hb Certains appareil sont dédié uniquement au dosage de cet HbA1c

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Permet d’éliminer l’interférence d’hémoglobine A1labile De bien séparer l’HbA1c des autres fractions (A1a et A1b) De signaler les Hémoglobines anormales (HbF,S,C,E) Et de pratiquer le dosage en présence de ses Hémoglobines

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C’est la meilleur technique dans tous les cas des Hémoglobines anormales

Chromatographie liquide a basse pression : 

Chromatographie liquide a basse pression System automatisé d’introduction récente Plus facile a utiliser et moins coûteux Mais moins fiable Mauvaise séparation des différentes hémoglobines en présence d’hémoglobine anormale

Immunoenzymatique par turbidimétrie : 

Immunoenzymatique par turbidimétrie Ac spécifique: 4 premiers AA de la chaîne B et le glucose fixé sur l’extrémité N terminale de cette chaîne compétition entre l’HbA1c et le polyaptene Lecture par densitomètrie

Agglutination de particule de latex : 

Agglutination de particule de latex Ac monoclonale spécifique de la chaîne terminale de l’HbA1c fixé sur une particule de latex Inhibition de l’agglutination sur latex Prélèvement est capillaire Appareil DCA2000 HBA1c

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Il n’existe pas actuellement de standardisation parfaite entre ses différentes méthodes Il existe une grande disparité des résultats d’un laboratoire a un autre Rendant leur comparaison impossible

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Recommandation de l’agence nationale d’accréditation et d’évaluation de la santé (ANES)

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Pour un patient donné l’HbA1c doit être doser dans le même laboratoire (comparaison des résultats successifs) Le compte rendu du laboratoire doit spécifié la technique utilisée

Slide 31: 

Objectif minimal a atteindre HbA1c égal a 6,5 %

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HbA1c entre 6,6 et 8 % (sur deux contrôles successifs) Une modification du traitement peut être envisagé en fonction de l’appréciation clinique

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L’HbA1c supérieur à 8% (deux contrôles successifs) Modification du traitement est a recommandé

conclusion : 

conclusion Le dosage de l’HbA1c est une estimation facile a obtenir de la glycémie moyenne sur les deux derniers mois Permet aux soignants d’évaluer le control glycémique et de fixer les objectifs thérapeutiques

conclusion : 

conclusion son dosage devrait être effectuer par une méthode certifiée soumise a un control de qualité Il es important de connaître les facteurs autre que la glycémie qui peuvent influencer son taux