CuernavacaMex2005

Estudios serologicos y de filogenia sobre la expansion del virus del Oeste del Nilo en Mexico 2002-2004Jose Guillermo Estrada FrancoUniversity of Texas at Galveston: 

Estudios serologicos y de filogenia sobre la expansion del virus del Oeste del Nilo en Mexico 2002-2004 Jose Guillermo Estrada Franco University of Texas at Galveston

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Organismos participantes: University of Texas Medical Branch. Pathology Department Secretaria de Agricultura Ganaderia Desarrollo Rural Pesca y Alimentacion de Mexico. Comision Mexico-USA para la Erradicacion de las Enfermedades Exoticas de los Animales (CPA-SAGARPA). United States Army Medical Research Institute of Infectious Diseases (USAMRIID). Fort Detrick, Maryland

Que es una enfermedad infecciosa emergente?: 

Que es una enfermedad infecciosa emergente? Un patogeno recientemente descubierto La expansion de un patogeno en una region nueva El cambio de un patogeno resultando en una enfermedad diseminada Un patogeno cruzando barreras entre especies diferentes Re-emergencia de un patogeno conocido

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Antecedentes 1.- Presencia de Virus del Oeste del Nilo en el continente Americano (Nueva York 1999). 2.-Evidencia serologica de Virus del Oeste del Nilo en comunidades Fronterizas del Estado de Texas cercanas a poblaciones urbanas y rurales del norte de Mexico durante el verano de 2002. 3.-Observacion de neuropatias en equinos en estados del Golfo de Mexico en el verano de 2002.

Estadisticas del Virus del Oeste del Nilo en el Estado de Texas 2002 (finales) * Primer aislado Junio 14, 2002: 

Estadisticas del Virus del Oeste del Nilo en el Estado de Texas 2002 (finales) * Primer aislado Junio 14, 2002

Evidencia serologica de CPA-SAGARPA en equinos durante el verano de 2002 norte de Coahuila y sur de Veracruz : 

Evidencia serologica de CPA-SAGARPA en equinos durante el verano de 2002 norte de Coahuila y sur de Veracruz Estado de Coahuila Estado de Veracruz

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18 Region Las Selvas Sureste de Veracruz. Areas de Muestreo de Equinos Agosto 2002 – Abril 2003 18 18 18 18

Casos de equinos infectados con Virus del Oeste del Nilo Veracruz Mexico en 2002 (4 caballos): 

Casos de equinos infectados con Virus del Oeste del Nilo Veracruz Mexico en 2002 (4 caballos)

Infected equines with WNV and VEE Veracruz Mexico en 2002 (4 equines) : 

Infected equines with WNV and VEE Veracruz Mexico en 2002 (4 equines)

Casos de equinos infectados con Virus del Oeste del Nilo Veracruz Mexico en 2002 (4 caballos): 

Casos de equinos infectados con Virus del Oeste del Nilo Veracruz Mexico en 2002 (4 caballos) Fecha de muestra

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Aislamientos Virales del VON en la República Mexicana Mayo 2003 – Septiembre 2004 Tecate, B.C. Sep-04 Mexicali, B.C. Nov-03 Hermosillo, Son. Nov-03 Etchejoa, Son. Ago-04 Monterrey, N.L. Jul-03 Aldama, Tamps. Oct-03 Villahermosa, Tab. May-03

Aislamientos Mexicanos de Virus del Oeste del Nilo (CPA-SAGARPA 2003-2004): 

Aislamientos Mexicanos de Virus del Oeste del Nilo (CPA-SAGARPA 2003-2004)

Corvus corax - Yumká Tabasco, Mx Mayo 2003 : 

Corvus corax - Yumká Tabasco, Mx Mayo 2003

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Dispatch West Nile Virus in Mexico: Evidence of Widespread Circulation since July 2002 José G. Estrada-Franco,* Roberto Navarro-Lopez,† David W.C. Beasley,* Lark Coffey,* Anne-Sophie Carrara,* Amelia Travassos da Rosa,* Tamara Clements,‡ Eryu Wang,* George V. Ludwig,‡ Arturo Campomanes Cortes,† Pedro Paz Ramirez,† Robert B. Tesh,* Alan D.T. Barrett,* and Scott C. Weaver* *University of Texas Medical Branch, Galveston, Texas, USA; †Comision Mexico-Estados Unidos para la Prevencion de la Fiebre Aftosa y Otras Enfermedades Exoticas de los Animales, Mexico City, Mexico; and ‡U.S. Army Medical Research Institute of Infectious Diseases, Fort Detrick, Maryland, USA Suggested citation for this article: Estrada-Franco JG, Navarro-Lopez R, Beasley DWC, Coffey L, Carrara A-S, Travassos da Rosa A, et al. West Nile virus in Mexico: evidence of widespread circulation since July 2002. Emerg Infect Dis [serial online] 2003 Dec [date cited]. Available from: URL: http://www.cdc.gov/ncidod/EID/vol9no12/03-0564.htm ------------------------------------------------------------------------ West Nile virus (WNV) antibodies were detected in horses from five Mexican states, and WNV was isolated from a Common Raven in the state of Tabasco. Phylogenetic studies indicate that this isolate, the first from Mexico, is related to strains from the central United States but has a relatively high degree of sequence divergence.

Dos hipotesis de porque no se se han presentado epizoodemias en el sur de la Republica Mexicana: 

Dos hipotesis de porque no se se han presentado epizoodemias en el sur de la Republica Mexicana 1.- Proteccion cruzada debido a la circulacion a la circulacion simultanea de otros flavivirus infectando a vertebrados 2.- Emergencia de una cepa atenuada de VON reduciendo su virulencia

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Dispatch Genome Sequence and Attenuating Mutations in West Nile Virus Isolate from Mexico David W.C. Beasley,* C. Todd Davis,* Jose Estrada-Franco,* Roberto Navarro-Lopez,† Arturo Campomanes-Cortes,† Robert B. Tesh,* Scott C. Weaver,* and Alan D.T. Barrett* *University of Texas Medical Branch, Galveston, Texas, USA; and †Comision Mexico-Estados Unidos para la Prevencion de la Fiebre Aftosa y Otras Enfermedades Exoticas de los Animales, Mexico City, Mexico The complete genome sequence of a Mexican West Nile virus isolate, TM171-03, included 46 nucleotide (0.42%) and 4 amino acid (0.11%) differences from the NY99 prototype. Mouse virulence differences between plaque-purified variants of TM171-03 with mutations at the E protein glycosylation motif suggest the emergence of an attenuating mutation.

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Secuencias Genomicas del Aislado TM-171 Mex03 Aislado de Corvux corax muerto en Mayo de 2003 en el parque zoologico “El Yumka” en Villahermosa, Tabasco. ARN RNA y posteriormente pasaje de cultivo celular Vero mandado a la UTMB. 46 diferencias nucleotidicas (0.42%) del aislado del Flamengo de NY99; 4 amino acidos diferentes: prM/M-141 Ile  Thr E-156 Ser  Pro* (perdida sitio de glicosilacion) NS4B-245 Ile  Val* NS5-898 Thr  Ile* *indica que mutaciones similares se han identificado en cepas de VON del viejo mundo

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Secuencias Mezcladas mostrando el sitio de Glicosilación del aislado de México Tabasco, 2003 Secuencias de Consenso : NY99 AAC TAC TCC ACA (NYST) MEX AAC TAC CCC ACA (NYPT) Clonas del producto de PCR de México 03Tab.y 5 clones secuenciados: Tres clones “CCC” – Pro Dos clones “TCC” – Ser Forward Reverse

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Proteina Estructural del Envoltorio en Flavivirus from Rey et al. (1995) Nature 375, 291-298.

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Lanciotti et al., 1999. Origin of the West Nile virus responsible for an outbreak of encephalitis in the northeastern U.S. [Science 286:2333-337.] Earlier antigenic comparisons (by cross-neutralization) defined similar antigenic subtypes: African (lineage 2) European (lineage 1 red) Kunjin Indian

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TM-171 Mex03 vs. NY99 vs. NY00-Perdiz3282

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Relaciones Filogenéticas del Aislado TM-171 Mex03 89 Interrelaciones del aislado de Nueva York 2000

Corvus corax – Tecate B.C., Mx. Sep 2004 : 

Corvus corax – Tecate B.C., Mx. Sep 2004

Diferencias nucleotidicas de la porción de la PrM-E del aislado de VON del Corvus corax de Tecate Baja California Septiembre de 2004: 

Diferencias nucleotidicas de la porción de la PrM-E del aislado de VON del Corvus corax de Tecate Baja California Septiembre de 2004 * Diferencias en el gene

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JEV 190. WNFCG 61. ETH76 Egypt101 Chin01 Italy1998 PaAn001 KN3829 RO9750 X00 X99 VLG4 Ast99 PaH001 IS98STD1 TWN126 Conn99 NY2001human NY99flam382 MD2000crow NJ2000MQ5488 HNY1999 NY99eqhs NY2000crow NY2000grouse CORVUS CORAX TAB 2003 CORVUS CORAX BC 2004 QUISCALUS MEXICANUS BC 2003 PHALACROCORAX AURITUS BC 2003 EQUINO TAMPS. 2003 FULICA AMERICANA BC 2003 EGRETA CAERULEA BC 2003 QUISCALUS MEXICANUS SON 2003 0.01 substitutions/site NJ Arbol Filogenético de VON mostrando asociaciones nucleotidicas completas de aislados Mexicanos con aislados de otros paises

La evidencia en México hasta Sep -2004 es de dos introducciones Independientes de Oeste del Nilo (VON): 

La evidencia en México hasta Sep -2004 es de dos introducciones Independientes de Oeste del Nilo (VON) Una en el Norte de la República Otra al Sur

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Arbol Filogenético de secuencias nucleotídicas de la PrM-E diferentes aislados del VON

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Arbol Filogenético de secuencias nucleotídicas de la PrM-E diferentes aislados del VON

Nucleotide and amino acid differences between WNV strains from Mexico Tabasco (May 2003) and US East coastal strains (PrM-E, Feb 2005) : 

Nucleotide and amino acid differences between WNV strains from Mexico Tabasco (May 2003) and US East coastal strains (PrM-E, Feb 2005)

Es necesario hacer estudios detallados de los Ciclos de Transmisión del VON en la República Mexicana: 

Es necesario hacer estudios detallados de los Ciclos de Transmisión del VON en la República Mexicana Que vectores y vertebrados estan involucrados en los ciclos de transmision Esto permitirá ayudar a predecir cuando los brotes de la enfermedad podrian ocurrir Prediciendo el potencial de esos brotes permitirá: Controlar los vectores específicos identificados Controlar a los hospederos Vacunando a la poblacion susceptible.

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Aedes aegypti 21 Culex restuans 41 Ochlerotatus infirmatus Aedes albopictus 22 Culex salinarius 42 Ochlerotatus japonicus Aedes cinereus 23 Culex stigmatosoma 43 Ochlerotatus melanimon Aedes vexans 24 Culex tarsalis 44 Ochlerotatus nigromaculis Anopheles atropos 25 Culex territans 45 Ochlerotatus provocans Anopheles barberi 26 Culex thriambus 46 Ochlerotatus sollicitans Anopheles crucians/bradleyi 27 Culiseta impatiens 47 Ochlerotatus squamiger Anopheles franciscanus 28 Culiseta inornata 48 Ochlerotatus sticticus Anopheles freeborni 29 Culiseta melanura 49 Ochlerotatus stimulans Anopheles hermsi 30 Culiseta morsitans 50 Ochlerotatus taeniorhynchus Anopheles punctipennis 31 Deinocerites cancer 51 Ochlerotatus triseriatus Anopheles quadrimaculatus 32 Ochlerotatus atlanticus/tormentor 52 Ochlerotatus trivittatus Anopheles walkeri 33 Ochlerotatus atropalpus 53 Orthopodomyia signifera Coquillettidia perturbans 34 Ochlerotatus canadensis 54 Psorophora ciliata Culex coronator 35 Ochlerotatus cantator 55 Psorophora columbiae Culex erraticus 36 Ochlerotatus dorsalis 56 Psorophora ferox Culex erythrothorax 37 Ochlerotatus dupreei 57 Psorophora howardii Culex nigripalpus 38 Ochlerotatus fitchii 58 Uranotaenia sapphirina Culex pipiens 39 Ochlerotatus fulvus pallens Culex quinquefasciatus 40 Ochlerotatus grossbecki t Especies de mosquitos positivas a VON en 2004 en USA (datos Arbonet).

Posibles vectores del VON en la Republica Mexicana: 

Posibles vectores del VON en la Republica Mexicana Especies Importancia relativa Genero Ochlerotatus ligera a mayor Oc. taeniorhynchus ligera Genero Psorophora ?? Coquilletidia perturbans ligera Genero Anopheles ??

Posibles vectores de virus del Oeste del Nilo en Mexico : 

Posibles vectores de virus del Oeste del Nilo en Mexico Especies Importancia Especies del genero Culex (Cux) Cx. nigripalpus Alta Cx. quinquefasciatus Alta Cx. salinarious Alta Cx. tarsalis Mayor Especies del grupo Cx. (Deinocerites) ?? Especies del grupo Cx. (Melanoconion) ??

Norte de la Republica Mexicana: 

Norte de la Republica Mexicana Los brotes mas severos de VON en los Estados Unidos actualmente estan ocurriendo en los Estados de California y Arizona. Ambos colindantes con los Estados de Baja California y Sonora. El analisis preliminar de el mas reciente aislado de VON de Tecate Baja California, Mexico del Corvux corax en Septiembre de 2004 apunta a una relacion identica a los virus de VON que estan produciendo los brotes del lado Americano. Hay muchas incógnitas que deben de resolverse para comprender estas diferencias

Reconocimientos: 

Reconocimientos Secretaria de Agricultura Ganaderia Pesca y Alimentacion (CPA-SAGARPA) de Mexico Jose Angel del Valle Molina Igor Romero Sosa Roberto Navarro Lopez Arturo Campomanes Cortes Pedro Paz Ramirez Veterinarios, Investigadores y Tecnicos de las 6 Regiones de CPA United States Army Research Institute of Infectious Diseases (USAMRIID) George Ludwig Tamara Clements Universidad de Texas en Galveston (UTMB) Scott Weaver Robert Tesh Amelia Travassos Da Rosa Alan Barret David Beasley Sophie Ann Carrara Lark Coffey Todd Davis Eleanor Deardorff